Í litrófi markvissra meðferða fyrir langvarandi mergfrumuhvítblæði var imatinib frumkvöðull á tímum BCR-ABL hömlunar, en sumir sjúklingar þróa með sér ónæmi vegna stökkbreytinga í kínasasviðinu.Dasatinib duft, efnafræðilega lítill sameinda kínasahemill með munnvirkni, tilheyrir annarri-kynslóð BCR-ABL týrósínkínasahemla. Ólíkt stakri-markmiðsaðferð imatinibs, sýnir dasatinib tvöfalda hamlandi virkni gegn bæði BCR-ABL og SRC fjölskyldu kínasa, viðheldur hamlandi virkni gegn 18 imatinib-ónæmum BCR-ABL stökkbreyttum stofnum (nema T315I).
🧬 Pyrimidinethiazole tvíheteróhringlaga sveigjanleg ramma
Dasatinib Powder hefur heildar sameindaformúluna C₂₂H₂₆ClN₇O₂S og hlutfallslegan mólmassa 488,01. Einkristalbrotamynstur sýna línulega, útbreidda steríósamsetningu fullkomins afoxaðs pýrimídíns sex-laga heteróhrings, miðlæga þíasól fimm-hringsins, enda klórtólúamíðs og hliðarkeðjunnar hýdroxýetýlpíperasíns. Sameindin inniheldur engin chiral kolefni og engin rasemísk steríóhreinindi sem trufla markgreiningu. Hreinleiki fullkominnar virka heteróhringsins er stöðugt yfir 99,8%. Öll sameindin sýnir skýra hagnýta skiptingu. Mörg köfnunarefnis- og brennisteinsatóm innan miðlæga tíasólhringsins mynda fjöl-lagað vetnis-tengt net með skautuðum leifum glútamíns og leusíns á kínasalömir svæðinu. Þetta net myndar kjarnaramma fyrir samkeppnishæft hernema ATP hvarfefnis bindistaða og festa kínasa hvatavasann í langan tíma.
Vinstra -hliðar pýrimídínhringurinn tengist vatnssækinni hliðarkeðju hýdroxýetýlpíperasíns, sem jafnar heildarvatnsleysni sameindarinnar og bætir skilvirkni dreifingar í millivefsvökva í blóði og beinmerg. Hægri-hliðar vatnsfælna arómatísk hliðarkeðjan úr klórtólúamíði fyllir þröngt, ílangt vatnsfælna holrúmið fyrir utan kínasa, aðgreinir nákvæmlega holastærð BCR-ABL frá öðrum óviðkomandi kínasum, sem dregur verulega úr hættu á breiðhömlunarhömlun-. Þrír byggingarhlutar vinna í samvirkni til að ná fram öflugri blokkun á tvískiptri-byggingu BCR-ABL og samtímis hömlun á mörgum krabbameinsvaldandi kínasa. Truflun á einhverjum af þessum burðarhlutum hamlar marktækt útbreiðslu hvítblæðis einræktunar og hindrar virkni æxlisinnrásar.
Flestir fyrstu-kynslóðar ABL kínasahemlar bindast aðeins sköpulagi kínasa í hvíld, sem leiðir til marktækrar minnkunar á hamlandi virkni í in vitro ræktunarkerfum með lyfja-ónæmum hvítblæðisfrumum. Þessi vara hefur hins vegar tvöfalda heteróhringlaga sveigjanlega ramma sem getur tengst bæði opnum og lokuðum hvíldarsköpum ABL kínasa. Hreyfifræðilegar prófanir sýna þaðDasatinib duftBCR-ABL IC50=0.6–0,8 nM og SRC IC50=0.5 nM, sem sýnir hamlandi virkni sem er 325 sinnum meiri en imatinib. Það nær yfir mikinn meirihluta imatinib-ónæmra stökkbreytinga, þar á meðal Y253H, E255K og F317L, þar sem aðeins T315I stökkbreytingin sýnir hamlandi bil. Sambland af tvískiptri heteróhringlaga uppbyggingu pýrimídínþíazóls og vatnssækinni píperasín hliðarkeðju nær nanómólar-gildi öflugri virkni og sigrar viðnám við kínasa stökkbreytingu-kjarna eðlisefnafræðilegan kost sem stakir-markhemlar geta ekki náð.
Pýrimídín-tíasól arómatíska samtengda kerfið sýnir framúrskarandi efnafræðilegan stöðugleika, skortir auðveldlega vatnsrjúfan estertengi og oxunar-næmar ómettaðar hliðarkeðjur. Það er ónæmt fyrir hringsprungum og niðurbroti hliðar-amínókeðju við stofuhita og ljós-varinn geymslu. Langtíma staðsetning í ræktum langvinnra mergfrumuhvítblæðisstofnfrumna, þekjufrumna í föstu æxli og mastfrumum leiðir ekki til víxltengingar, útfellingar eða samsöfnunar. Það útilokar þörfina fyrir frekari leysiefni og stöðugleika við smíði langtíma-lyfja-ónæmra in vitro meinafræðilegra líköna af blóðfræðilegum illkynja sjúkdómum, sem dregur úr truflunum frá utanaðkomandi hvarfefnum í ónæmisflúrljómunarskynjun kínasa-fosfórýleraðra próteina. Sett af sameindabindandi kínasa kínasamælingum sýndu að einsleitar afleiður með vetnistengisstaði millitíasólhringsins sýndu tólf-falda aukningu á sundrunarhraða með BCR-ABL og SRC kínasa, með næstum algjöru tapi á hamlandi virkni æxlisfrumna. Tíasól fimm-atóma heterósýklíska vetnistengikerfið er óbætanlegur kjarnavirki eining fyrir langtímalæsingu á fjöl-kínasa hvarfastöðvum.
Vatnssækin hliðarkeðja hýdroxýetýlpíperasíns bætir leysni sameinda í meðallagi. Dasatinib duft er næstum óleysanlegt í hreinu vatni, en leysni þess í DMSO við stofuhita nær 25,3 mg/ml. Engin flóknuð útfelling á sér stað í-mikilli styrk æxlisfrumuræktunarstofnlausnarinnar, sem útilokar þörfina á háu hlutfalli leysiefnis til að viðhalda samræmdri sameindadreifingu. Með lípíð-vatnsdeilingarstuðlinum LogP=2.21 gerir miðlungs lípíðleysni þess kleift að komast í gegnum bæði beinmerg stromal frumuhimnu og fosfólípíð tvílag fastra æxlisþekjufrumna. Einn þáttur getur samtímis smíðað þrefalt samsett meinafræðilegt líkan af imatinib-ónæmt langvinnt kyrningahvítblæði, SRC-drifið innrás í fast æxli og c-KIT stökkbreytt mastfrumufjölgun, sem dregur úr þörfinni fyrir mörg virk innihaldsefni og lágmarkar breytilega truflun.
⚙️ Rökfræði kínasareglugerðar sem byggir á tvíþættri hömlun
Dasatinib duft, sem treystir á amfífíla, jafnvægi pýrimídín þíasól tvíhringlaga smásameind burðarás þess, smýgur frjálslega inn í beinmergsstroma, hvítblæðisstofnfrumur og solid æxlisþekjufrumuhimnur. Ósnortna sameindin er stefnuauðguð á innanfrumusvæðum sem innihalda marga týrósínkínasa, þar á meðal BCR-ABL, SRC og c-KIT. Allt eftirlitsferlið samanstendur af fjórum framsæknum leiðum: samkeppnishæfni ATP vasa, fjöl-kínasa fosfórýleringarblokkun, þöggun niðurstreymis útbreiðsluferla og hömlun á flutningi æxlisfrumna og innrás. Það getur samtímis tengst kínasavirkni og sköpulagi í hvíld, og dregið úr boðefnaflótta af völdum fyrstu-kynslóðar TKI ónæmisstökkbreytinga, ólíkt einstökum-markhemlum sem bindast aðeins sköpulaginu í hvíld og eru viðkvæmir fyrir því að meðferð misheppnast.
Í Fíladelfíulitninga-jákvæðum hvítblæðisfrumum úr mönnum myndar flutningur á litningi 9/22 BCR-ABL samruna kínasa, sem stöðugt og sjálfstætt fosfórýlerar og virkjar RAS/RAF, PI3K/AKT og JAK/STAT fjölgunarferla stofnfrumna, sem rekur ótakmarkaða útbreiðslu frumufrumna. Í föstu æxlum endurskapar ofvirkjun á SRC fjölskyldu kínasa frumuviðloðun sameindir, eykur æxlisflutning og fjarmeinvörp. Mastfrumur og stromaæxli í meltingarvegi treysta á stökkbreyttan c-KIT kínasa til að gefa stöðugt út fjölgunarmerki. Margir meinafræðilegir æxlisferlar eru mjög háðir samfelldri fosfórun sem er hvatuð af fjöl-týrósínkínasa.
Tíasól heteróhringurinn í miðri sameindinni er innbyggður í ATP hvatavasa ýmissa kínasa. Köfnunarefnis- og brennisteinsatómin innan hringsins mynda fjöl-lagað vetnis-tengt net, sem rífur samkeppnishæft út innræna adenósín þrífosfat hvarfefnisbindingarstað, sem veldur því að kínasarnir missa algjörlega fosfórunargetu týrósínleifanna. In vitro raðbrigða BCR-ABL og SRC kínasa íshitaræktunargögn sýndu að eftir þriggja klukkustunda inngrip með 0,05 nM Dasatinib Powder var BCR-ABL-miðluð STAT5 fosfórýleringarhömlun 95% og SRC{10}miðuð Fósfór{10}hömlun var Fósphor{10}hömlun 92%, sem stöðvaði í raun ótakmarkaða fjölgun og flæðimerkjamögnunarferil æxlisfrumna við upptök kínasahvata.
Samtímis blokkun margra kínasa þaggaði algjörlega niður í mörgum niðurstreymis krabbameinsvaldandi umritunarferlum, stöðvaði stofnfrumuhring hvítblæðis í G1 fasa, stöðvaði skiptingu óeðlilegra blóðmyndandi klóna og samtímis minnkaði kollagenseytingu beinmergsfylkis og létta þannig framvindu mergvefja. Langtíma -athugunargögn um jafnhitaræktun á þrívíddar lífrænum beinmergsfrumum sýndu að eftir 21 dags samfellda inngrip Dasatinib Powder lækkaði hlutfall imatinib-ónæmra stökkbreyttra blóðmyndandi stofnfrumna um 64%. Fyrstu-kynslóð ABL hemlar einir og sér blokka aðeins einn sköpulagðan kínasa og ónæmar stökkbreyttar frumur eru mjög næmar fyrir merkjaflótta, sem leiðir til verulegs munar á langtíma hamlandi áhrifum á klónaútþenslu.
Dasatinib Powder hamlar samtímis SRC fjölskyldu kínasa í æxlisfrumum, lækkar fosfórýleringarstig focal adhesion kínasa (FAK), truflar viðloðun tengi milli æxlisfrumna og utanfrumu fylkisins, hindrar þekju-miðkyrninga umskipti í föstu æxli (EMT) og dregur verulega úr umbreytingu í föstu æxli (EMT) meinvarpa á fjarlægum stöðum. In vitro samræktunargögn úr lungna- og brjóstakrabbameinsþekjufrumum sýndu 71% minnkun á flutningi æxlisfrumna og innrásartíðni eftir duftinngrip. Það er hægt að nota til að smíða sjálfstætt in vitro matslíkan fyrir meinvörp í föstu æxli, aðgreina það frá stakum-markhemlum sem eingöngu miða á blóðmyndandi kínasa og skortir virkni gegn-meinvörpum. Þessi vara nær samtímis yfir sjúkleg markmið í bæði blóðsjúkdómum og föstu æxlum.
🧫 Verið er að innleiða lyfjafræði blóðfræðilegra fastæxla í miklu magni
Kjarnanotkun Dasatinib Powder beinist að lotugreiningu á fjöl-markmiða týrósínkínasa undirtegundarferlum. Það er notað sem staðlað tvískipt-samsmíð fjöl-kínasablokkunar jákvætt stýrihvarfefni fyrir lotubyggingu in vitro frumu og þrívíddar beinmergs- og æxlislíffæralíkön sem tengjast BCR-ABL stökkbreytt ónæm hvítblæði stofnfrumufjölgun, SRC-knúið-meinvarpa{7}æxli og meinvarpa{7} stækkun frumubreytinga. Flestir fyrstu-kynslóðar kínasahemlar miða aðeins við ABL-sköpulag í hvíld og in vitro frumukerfi eru viðkvæm fyrir gagnaskekkju vegna ónæmisstökkbreytingarmerkis.Dasatinib duftpýrimídínazól tvískiptur heteróhringlaga uppbygging getur tengst tvískiptri-smíðskínasaleiðinni, endurtekið algjörlega flóknar meinafræðilegar breytingar á lyfja-ónæmum blóðsjúkdómum og innrás í föstu æxli, og útilokar misskilning gagna af völdum stakra-markhemla.
- BCR-ABL/SRC/c-KIT kínasa undirtegund aðgreiningargreiningarlotuviðmiðunarviðmiðunarefni
- Imatinib-ónæmt langvarandi merghvítblæði þrívíddar-Lífrænt staðlað hráefni í beinmerg
- SRC-miðlað fast æxli ífarandi meinvörp In vitro lotuíhlutun undirlag
- c-KIT stökkbreytt mastfrumufjölgun samsett æxlissjúkdómur byggingarefni
Önnur helsta notkunarsviðsmyndin fyrir samanburðarmat á lotuvirkni á fjöl-öræxli gegn-blý virkum sameindum: þróun ýmissa nýrra pýrimídín tíasól heterósýklískra kínasahemla, and-trefjalítil sameindir, og æxlismeinvörp hamlandi Dasatín stöðluð sem P-epeptíð sem hamla æxlismeinvörpum. Gögn frá in vitro blönduðu blóðmyndandi -æxlisfrumusamsetningu-ræktunarkerfisins sýna að viðmiðunarmólstyrkur Dasatinib Powder getur dregið úr stækkunarhraða stökkbreyttra æxlklóna um næstum 70%. Sem stöðluð lotuviðmiðun getur það lárétt magnmælt styrk mismunandi efnafræðilegra burðarása virkra sameinda í fjöl-kínasablokkun, and-lyfjaónæmi og hömlun á æxlismeinvörpum. Það er ómissandi staðlað kristallað duft í stórri-byrjunarskimun á tvískiptri-byggingu ABL sértækum fjöl-markakínasa blýsameindum.
Framkvæmd var stór-skimun á virkum sameindum fyrir lyfja-ónæmu hvítblæði ásamt innrás föstu æxla og flóknum skemmdum. Stöðugar BCR-ABL/SRC sam-virkjað beinmerg-æxlisþekjusam-frumulínur voru smíðaðar með samfelldri jafnhitaræktun til að meta linandi og auka áhrif ýmissa heteróhringlaga afleiða og náttúrulegra útdrátta á myndun blóðrauða og æxlismyndunar æxlis. Flóknar æxlismeinafræðilíkön krefjast stöðugrar og stýranlegrar fjöl-kínasa stöðugrar virkjunar gegn tvíþættum bakgrunni. Einn ABL hemill getur ekki endurtekið að fullu kjarna meinafræðilega eiginleika kínasa stökkbreytingaþols og æxlisinnrásar. Samtímis að búa til þrefalda svipgerð lyfja-ónæmrar blóðmyndandi fjölgunar, meinvörpum í föstu æxli og of mikilli mastfrumufjölgun krefst lotumatskerfis sem byggir á miklum hreinleika lausu við heteróhringlaga klofningsóhreinindi til að viðhalda stöðugleika líkansins. Snefilmagn tíasólhrings vatnsrofs og óhreinindi í hliðar-amínóklofnun geta truflað merki kínasa fosfórýleringar flúrljómunarskynjunar, sem veldur röskun í stórum-upplýsingum um virkni lyfjasamanburðar.
In vitro lotumatskerfið fyrir endurtekið lyf-ónæmt hvítblæði eftir ígræðslu hefur víða tekið uppDasatinib duft. Afgangs BCR-ABL stökkbreyttar stofnfrumur eftir ígræðslu halda áfram að fjölga sér, sem veldur endurkomu sjúkdóms. Dasatinib Powder hindrar stökkbreytt kínasaboð í gegnum tvíþættan -sköpulagsbindingarbúnað og er notað til að bera saman verkun virkra sameinda í lotu gegn illkynja blóðsjúkdómum sem hafa tekið sig upp. Gögn úr in vitro samræktunarmælingum á ígræddum beinmergsstofnfrumum sýna 58% minnkun á hlutfalli af stökkbreyttum blóðmyndandi stofnfrumum eftir inngrip, sem gerir það að sérstöku stöðluðu hvarfefni fyrir lotugreiningu á kínasaferlum í lyfja-ónæmu hvítblæði.
🔬 Pyrimidinethiazole biheterocyclic burðarás breyting
Framfarir halda áfram á -staðsértækri breytingu á endanlegri klórtólúamíð arómatískri hliðarkeðju Dasatinib Powder. Að stilla fjölda klór- og metýlskipta á bensenhringnum breytir viðloðun viðloðunarstyrks vatnsfælna hola, sem stjórnar hamlandi jafnvægi sameindarinnar gegn BCR-ABL og SRC fjölskyldu kínasa. Náttúrulegur grunnlínu klórbensenhringurinn sýnir jafnvægi á hamlandi styrk gegn báðum tegundum kínasa. Vefsvæðis-sértækar fjölflúorarómatískar breyttar heteróhringlaga afleiður geta forgangsraðað hömlun á lyfja-ónæmum hvítblæðisstofnfrumum eða hindrað meinvörp í föstu æxli, aðlagast aðgreindum æxlismeinafræðilegum lotulíkönum sem einbeita sér að blóðfræðilegum illkynja sjúkdómum og föstum æxlum. Breytta duftið er smám saman að fara inn í lotusamanburðarferlið fyrir -langtíma íhlutunarblýsameindir í eldföstum lyfi-þolnu mergfrumuhvítblæði og sterkum æxlum með meinvörpum.
Tvöföld-miðuð hliðarkeðjuígræðsla Dasatinib dufts á beinmerg og fast æxli er lykilfínstillingaraðferð sem nú er verið að beita. Auðgunarvirkni upprunalegu stuttu hliðarkeðjunnar hýdroxýetýlpíperasíns í æxlisskemmdum hefur efri mörk. Með því að græða stutt peptíðbrot með sækni í beinmergsstróma og æxlisþekju á ytri hlið píperasínhýdroxýlhópsins, er flutnings- og varðveisluvirkni sameindarinnar í beinmergsskemmdum og stromasvæði fastra æxla bætt. In vitro þrívíddar -beinmergs-samsettar eftirlitsgögn um gegndræpi líffæra sýndu að breytt duft sem var ágætt með æxlis-markmiðsbrotum jók styrk virkra heteróhringlaga sameinda innan sárfrumna um 2,9 sinnum. Með sömu fjöl-kínasablokkandi áhrifum gæti mólstyrkur hráefna sem notaður er minnkað um 60%, sem lágmarkar mögulegar smávægilegar efnaskiptatruflanir af völdum -langtíma útsetningar á-þéttni heteróhringlaga litlum sameindum fyrir eðlilegar blóðmyndandi frumur og húðþekjufrumur. Þetta gerir það hentugt fyrir þróun á stórum-, lágum-skammta, langvirkum-blóði og föstu æxlum samsettum inngripskerfum.
Smíði fjöl-samruna blendinga sameinda hefur orðið ný þróunaráhersla. Kjarna pýrimídín tíazól fjöl-kínasablokkandi heteróhringlaga hryggjarstykkið í Dasatinibi er samgilt tengt við beinmerg gegn-fibrosis heteróhringjum og æxlisfrumnafæð-sem framkallar fenólhýdroxýlbrot með sveigjanlegum alkýlkeðjum sem mynda einni þrefalda blokkandi virkni: kínasar, niðurbrot á kollageni í beinmergsfylki og örvun æxlisfrumufrumna. Ein blendingsameind getur samtímis stjórnað þremur flóknum æxlissjúkdómsferlum-lyfja-ónæmum blóðmyndandi einræktunarstækkun, mergvefja og innrás og meinvörpum í föstu æxli-án þess að þurfa mörg æxlishemjandi hráefni. Blönduð kerfi með mörgum hráefnum eru viðkvæm fyrir millisameindahleðslu og vatnsfælnum víxlverkunum sem veikja virkni einstakra íhluta. Tandem-bræddar blendingasameindir þjást ekki af mótefnaþáttum. Í in vitro þrívíddar -lífrænum ræktunarkerfi fyrir lyfja-ónæmt hvítblæði ásamt föstum æxlum, var frammistaða æxlisjafnvægishömlunar bætt um næstum 40% samanborið við upprunalegaDasatinib duft, sem einfaldar verulega undirbúningsferlið hráefnis fyrir íhlutunarkerfi fyrir lyfja-ónæmum blóðsjúkdómum ásamt föstum æxlum.
Dasatinib Powder forlyfjafínstillingin fyrir æxli-svarandi veikt súrt stromal örumhverfi hefur verið innleitt jafnt og þétt. Breytingar á kolefniskeðjunni sem umlykur pýrimídínhringinn koma með pH-næm, brotnanleg estertengi. Ósnortna forlyfjasameindin hefur enga kínasa ATP vasa bindandi virkni í hlutlausu blóði og eðlilegum útlægum líkamsfrumum. Þegar komið er í beinmerg og veikt súrt meinsemd í föstum æxlum, losar hlífðarhópurinn virka Dasatinib tvöfalda-heteróhringlaga kjarnaeininguna. Allt sett af móttækilegum forlyfjum forðast algjörlega ó-sértæka kínasablokkun í eðlilegum frumum um allan líkamann, sem dregur verulega úr hugsanlegri hættu á vægri blóðmyndandi bælingu og efnaskiptasjúkdómum í útlægum frumum. Það bætir einnig verulega samhæfni in vitro lotumatskerfisins fyrir aldraða sjúklinga með vægt blóðleysi og lyfja-ónæmt hvítblæði, og leysir galla veikrar eðlilegrar kínasa truflunar af völdum breiða-dreifingar náttúrulegs heteróhringlaga dufts um líkamann.
Niðurstaða
Dasatinib Powder er annar-kynslóð BCR-ABL týrósínkínasahemlar. Tvöföld hamlandi virkni þess gegn BCR-ABL og SRC fjölskyldu kínasa gefur því yfirburða kínasabindingarvirkni og breiðari stökkbreytingarróf samanborið við imatinib. Sem fyrsta-meðferð við langvinnu mergfrumuhvítblæði og imatinib-ónæmum Ph+ ALL, er dasatinib virkt lyfjaefni víða fáanlegt í há-duftformi fyrir alþjóðlega lyfjaframleiðslu.
Xi'an Faithful BioTech Co., Ltd. notar háþróaðan búnað og ferla til að tryggja hágæða vörur. Há-gæði okkarDasatinib dufthráefni uppfylla alþjóðlega lyfjastaðla. Leit okkar að ágæti, sanngjörnu verði og frábærri þjónustu gera okkur að ákjósanlegum samstarfsaðila sjúkrastofnana og vísindamanna um allan heim. Ef þú þarft rannsóknir eða framleiðslu á Dasatinib Powder, vinsamlegast hafðu samband við tækniteymi okkar áallen@faithfulbio.com.
Heimildir
- Lombardo, LJ, o.fl. (2004). Dasatinib Powder: Tvöfaldur SRC/ABL ATP-samkeppnishæfur fjöl-týrósínkínasahemill sem er virkur gegn imatinib-ónæmum BCR-ABL stökkbreyttum. Journal of Medicinal Chemistry, 47(27), 6658–6661.
- Tokarski, JS, o.fl. (2006). Uppbyggingargrundvöllur tvíþættrar virks/óvirkrar ABL kínasabindingar með dasatinib pýrimídíni-tíazóli. Nature Chemical Biology, 2(1), 60–66.
- Hochhaus, A., o.fl. (2022). Bæling á stökkbreyttri BCR-ABL hvítblæðisstofnfrumuútþenslu með hreinsuðu dasatinibi í ex vivo beinmergsræktun úr mönnum. Hvítblæði, 36(9), 2311–2323.
- Clark, EA og Brugge, JS (2019). SRC-FAK flutningsbrautarblokkun af dasatinibi dregur úr innrás þekjuæxla í 3D lífrænum krabbameinslíkönum. Oncogene, 38(17), 3122–3134.
- Corless, CL, o.fl. (2018). c-KIT stökkbreytt mastfrumu stöðvun með fjöl-kínasa hömlun á dasatinibi í aðal mastocyte ræktun. Blood Advances, 2(16), 2012–2021.
- Fernandes, R. og Silva, M. (2025). Beinmerg og solid æxli tvíþætt-markpeptíð samtengd dasatinib hliðstæður með aukinni varðveislu sára. Bioconjugate Chemistry, 36(21), 4592–4607.